2-[[2-Εθοξυ-4-(4-υδροξυ-1-πιπεριδινύλιο) φαινυλο]αμινο]-5,11-διϋδρο-5,11-διμεθυλο-6H-πυριμίδιο[4,5-β][1,4]βενζοδιαζεπίνη-6-

Περιγραφή του προϊόντος:

Ονομασία προϊόντος: 2-[[2-Εθοξυ-4-(4-υδροξυ-1-πιπεριδινύλιο) φαινύλιο]αμινο]-5,11-διϋδρο-5,11-διμεθυλο-6H-πυριμίδιο[4,5-β][1,4]βενζοδιαζεπίνη-6-ένα CAS NO:1234480-50-2

Συνώνυμα:

XMD 8-92 (ελεύθερη βάση) ·

6H-Πυριμίδιο[4,5-β][1,4]βενζοδιαζεπίνη-6-ένα,2-[[2-αιτοξυ-4-(4-υδροξυ-1-πιπεριδινύλιο) φαινυλο]αμινο]-5,11-διϋδρο-5,11-διμεθυλο-·

Χημικές και φυσικές ιδιότητες:

Εμφάνιση: λευκή έως σχεδόν λευκή σκόνη

Αξιολόγηση: ≥98,0%

Πυκνότητα:10,3 g/cm3

Σημείο βρασμού:7410,8°C σε 760 mmHg

Σημείο ανάφλεξης:4020,4°C

Στο εξωσωματικό

Το XMD8-92 παρουσιάζει τη μεγαλύτερη συγγένεια προς το BMK1 με μετρούμενη σταθερά διαχωρισμού (Kd) 80 nM, ενώ το DCAMKL2, το TNK1 και το PLK4 παρουσιάζουν Kd ς 190, 890 και 600 nM, αντίστοιχα.Το XMD8-92 προφίλεται σε σχέση με όλες τις ανιχνεύσιμες κινάσες στα λυσάσματα κυττάρων HeLa χρησιμοποιώντας τη μέθοδο KiNativ και διαπιστώνεται ότι είναι περίπου 10 φορές πιο επιλεκτικό για το BMK1 με IC50 της τάξης του 1..5 μM από τους πιο ισχυρούς εκτός στόχους, TNK1 (IC50=10 μM) και ACK1 (γνωστός και ως TNK2, IC50=18 μM). Άλλοι αδύναμοι εκτός στόχοι περιλαμβάνουν τον τομέα κινάσης 2 των RSK1 και RSK2, PIK4A και PIK4B και FAK.Το MEK5 δεν αναστέλλεται σημαντικά από το XMD8-92 έως 50 μM [1]Το XMD8-92 παρουσιάζει υψηλή επιλεκτικότητα στην BMK1 σε in vitro δοκιμή ανταγωνιστικού δεσμού στον τόπο ATP κατά 402 κινάσες καθώς και στη μέθοδο KiNativ κατά όλες τις ανιχνεύσιμες κινάσες στα λυσάσματα των κυττάρων HeLa.Το XMD8-92 εμποδίζει την ενεργοποίηση της BMK1 που προκαλείται από το EGF με IC50 240 nM και, με συγκέντρωση έως και 5 μM, το XMD8-92 δεν έχει ανασταλτική επίδραση στην ενεργοποίηση του ERK1/2 από το EGF[2].

Ζωντανά

Το XMD8-92 αναστέλλει σημαντικά την ανάπτυξη του όγκου in vivo κατά 95%. Η φαρμακοκινητική του XMD8-92 αξιολογείται σε αρουραίους Sprague-Dawley στους οποίους χορηγείται μία ενδοφλέβια ή από του στόματος δόση.0 ωρών διάκριση ημιζωής 26 mL/min/kgΤο XMD8-92 έχει μέτρια διανομή στους ιστούς με υπολογισμένο όγκο διανομής 3, 4 L/ kg. Το XMD8-92 έχει υψηλή από του στόματος βιοδιαθεσιμότητα με 69% της δόσης να απορροφάται.Μετά από μία εφάπαξ από του στόματος δόση 2 mg/kgΣε πειράματα ανεκτικότητας, οι μέγιστες συγκεντρώσεις πλάσματος περίπου 500 nM παρατηρούνται μετά από 30 λεπτά, με 34 nM να παραμένουν 8 ώρες μετά τη δόση.υψηλές συγκεντρώσεις στο πλάσμα του φαρμάκου (περίπου 10 μM μετά από δόση IP 50 mg/ kg) διατηρούνται καθ' όλη τη διάρκεια των 14 ημερώνΤο XMD8-92 φαίνεται να είναι καλά ανεκτό και τα ποντίκια φαίνονταν υγιή χωρίς σημάδια δυσφορίας.Η θεραπεία με το XMD8-92 σε τόσο ανοσοκατάλληλα όσο και ανοσοανεπαρκή ποντίκια εμπόδισε την ανάπτυξη των όγκων των πνευμόνων και του τραχήλου της μήτρας., αντίστοιχα, κατά 95%. This remarkable anti-tumor effect of XMD8-92 in lung and cervical xenograft tumor models is due to XMD8-92’s capacity to inhibit tumor cell proliferation through the PML suppression-inducted p21 checkpoint proteinΕπιπλέον, η αποβολή του BMK1 (KO) στα ποντίκια οδηγεί σε πλήρη και μη αναστρέψιμη αφαίρεση της πρωτεΐνης BMK1,Ενώ η θεραπεία με το XMD8-92 σε ποντίκια καταστέλλει μόνο τη δραστηριότητα του BMK1Δεύτερον, η αστάθεια του αγγείου που παρατηρήθηκε στα ποντίκια BMK1 KO μπορεί να οφείλεται στην έλλειψη του μη κιναζικού τομέα του Τερματικού C του BMK1,που εξακολουθεί να υπάρχει κατά τη διάρκεια της θεραπείας των ζώων με το XMD8-92 [2].

Δοκιμασία Κινάσης

Το προφίλ KiNativ του XMD8-92 διεξάγεται τόσο με ATP όσο και με ADP acylphosphate- desthiobiotin με τις ακόλουθες τροποποιήσεις.Τα λυσάτα κυττάρων HeLa (5 mg/ml συνολικής πρωτεΐνης) εκκολάπτονται παρουσία XMD8-92 σε 50 μM, 10 μM, 2 μM, 0,8 μM και 0 μM για 15 λεπτά πριν από την προσθήκη του ανιχνευτή ακιλοφωσφορικού οξέος ATP ή ADP (5 μM τελική συγκέντρωση ανιχνευτή).Οι αντιδράσεις του ανιχνευτή διεξήχθησαν για 10 λεπτά και η αντίδραση σταμάτησε με την προσθήκη ουρίας και επεξεργάστηκε για ανάλυση της σκλήρυνσης κατά πλάκας. Samples are analyzed by LC-MS/MS on a linear ion trap mass spectrometer using a time segmented “target list” designed to collect MS/MS spectra from all kinase peptide-probe conjugates that can be detected in HeLa cell lysatesΟ κατάλογος αυτός των στόχων δημιουργείται και επικυρώνεται με προηγούμενη εξαντλητική ανάλυση των ελαλεισικών.Μέχρι τέσσερα χαρακτηριστικά ιόντα θραύσματος για κάθε συνδυασμό πεπτιδίου-ζώνης κινάσης χρησιμοποιούνται για την εξαγωγή σημάτων για κάθε κινάση, και μια σύγκριση των αναστολέων που έχουν υποβληθεί σε θεραπεία με τα (μη υποβληθέντα σε θεραπεία) λυσάτα ελέγχου επιτρέπουν τον ακριβή προσδιορισμό του ποσοστού αναστολής σε κάθε σημείο.Ένα χειρόγραφο που περιγράφει τις λεπτομέρειες αυτής της στοχευμένης προσέγγισης φασματομετρίας μάζας βρίσκεται σε προετοιμασία [1].

Διαχειριστής ζώων

Τα ποντίκια[1] Τα κύτταρα 5×105 HeLa αναστέλλονται στο DMEM και εγχέονται υποδόρια στην δεξιά πλευρά των ποντικών Nod/Scid ηλικίας 6 εβδομάδων (ημέρα 0).Τα ποντίκια τυχαιοποιήθηκαν σε 2 ομάδες (6 ζώα).Η ομάδα XMD8-92 (1-28 ημέρες) αντιμετωπίζεται με XMD8-92 σε δόση 50 mg/ kg δύο φορές ημερησίως ενδοπεριτοναίως.Η ομάδα ελέγχου λαμβάνει καθημερινές ενέσεις του διαλύματος φορέα ως ομάδα ελέγχου.Στις 7 ημέρες, η ομάδα ελέγχου τυχαιοποιείται σε 2 ομάδες (6 ζώα, XMD8-92, 7-28 ημέρες, και 12 ζώα, έλεγχος).η υπόλοιπη ομάδα ελέγχου τυχαιοποιείται σε 2 ομάδες (6 ζώα)Η θεραπεία με XMD8-92 στις ομάδες XMD8-92 (7-28 ημέρες) και XMD8-92 (14-28 ημέρες) αρχίζει την 7η και την 14η ημέρα, αντίστοιχα.Το μέγεθος του όγκου μετριέται χρησιμοποιώντας ένα σφιγκτήρα, και ο όγκος του όγκου προσδιορίζεται[1].

Αναφορές:

[1] Yang Q, et al. Φαρμακολογική αναστολή του BMK1 καταστέλλει την ανάπτυξη του όγκου μέσω πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης πρωτεΐνης

Γιανγκ Q, et al. Στόχος της οδού κινάσης BMK1 MAP στη θεραπεία του καρκίνου.

Η κινάση ALK διεγείρει την κινάση ERK5 για να προωθήσει την έκφραση του ογκογόνου MYCN στο νευροβλάστωμα. Sci Signal. 2014 Oct 28;7 ((349):ra102.

Εάν ενδιαφέρεστε για τα προϊόντα μας ή έχετε οποιεσδήποτε ερωτήσεις, παρακαλούμε να αισθάνεστε ελεύθεροι να επικοινωνήσετε μαζί μας!

Τα προϊόντα που καλύπτονται από δίπλωμα ευρεσιτεχνίας προσφέρονται μόνο για σκοπούς Ε & Α. Ωστόσο, η τελική ευθύνη ανήκει αποκλειστικά στον αγοραστή.